日本a级毛片,国产真实乱对白精彩,一区二区在线 | 欧洲,学长别揉了我快尿了男男

技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 紫外交聯(lián)儀用于Southern印跡雜交

紫外交聯(lián)儀用于Southern印跡雜交

更新時間:2023-04-19   點擊次數(shù):939次

紫外交聯(lián)儀用于Southern印跡雜交

Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則特異性地雜交形成雙鏈。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經干烤或者紫外交聯(lián)儀的紫外線照射固定,再與相對應結構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量  。

由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性,綜合凝膠電泳和核酸內切限制酶分析的結果,便可繪制出DNA分子的限制圖譜。但為了進一步構建出DNA分子的遺傳圖,或進行目的基因序列的測定以滿足基因克隆的特殊要求,還必須掌握DNA分子中基因編碼區(qū)的大小和位置。有關這類數(shù)據資料可應用Southern印跡雜交技術獲得。

Southern印跡雜交技術包括兩個主要過程:一是將待測定核酸分子通過一定的方法轉移并結合到一定的固相支持物(硝酸纖維素膜或尼龍膜)上,即印跡(blotting);二是固定于膜上的核酸與同位素標記的探針在一定的溫度和離子強度下退火,即分子雜交過程。該技術是1975年英國愛丁堡大學的E.M.Southern的,Southern印跡雜交故因此而得名。早期的Southern印跡是將凝膠中的DNA變性后,經毛細管的虹吸作用,轉移到硝酸纖維膜上。印跡方法如電轉法、真空轉移法;濾膜發(fā)展了尼龍膜、化學活化膜(如APT、ABM纖維素膜)等。利用Southern印跡法可進行克隆基因的酶切、圖譜分析、基因組中某一基因的定性及定量分析、基因突變分析及限制性片斷長度多態(tài)性分析(RFLP)等。

紫外交聯(lián)儀為什么有人稱為DNA紫外交聯(lián)儀,核酸紫外交聯(lián)儀?

紫外交聯(lián)儀主要用于Northern和Southern印跡雜交實驗中將DNA或RNA從凝膠轉移到尼龍膜后固膜。

Northern印跡雜交(Northern blot)。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術由Southern于1975年創(chuàng)建,稱為Southern印跡技術,RNA印跡技術正好與DNA相對應,故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質印跡技術則被稱為Western blot。

Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經干烤或者紫外線照射固定,再與相對應結構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。

DNA是核酸的一種,核酸包括DNA和RNA。核酸的功效與作用是合成蛋白、維持機體免疫反應和抗氧化,核酸是一種生物大分子,在蛋白質的復制和合成中既儲存和傳遞遺傳信息的作用,能夠維持機體正常的免疫反應,具有一定抗氧化的作用,還能夠促進細胞的分化以及影響生物合成,又能夠促進身體營養(yǎng)的吸收和利用。

斑點雜交(dot blot)是指將待測的DNA變性后點加在硝酸纖維素膜(或尼龍膜、NC膜)上,用已標記的探針進行雜交,洗膜(除去未接合的探針),放射自顯影,判斷是否有雜交及其雜交強度,主要用于基因缺失或拷貝數(shù)改變的檢測。

狹縫斑點雜交(slot blot):也是廣義dot blot的一種。圓點的形狀因為點很小后期不利于光密度分析,并且孔不易清洗干凈。從點雜交角度來說,狹縫與斑點印跡沒有區(qū)別,只是終印跡形狀不同。如果覺得自己樣品量不大,擔心樣品不能填滿狹縫其實也不是問題,因為不填滿狹縫也不影響雜交結果,多是狹縫長短不整齊,另外,通過稀釋樣品填滿狹縫以后再做雜交,后印跡雜交結果不受影響。

上海路陽儀器有限公司

上海路陽儀器有限公司

地址:上海市松江區(qū)新橋鎮(zhèn)泗磚南路255弄120號

主營產品:黑光燈,探傷燈,紫外線探傷燈,LED磁粉探傷燈,熒光檢漏燈,熒光檢漏劑,檢漏手電筒,脫脂檢測燈

© 2025 版權所有:上海路陽儀器有限公司  備案號:滬ICP備10002130號-7  總訪問量:253307  站點地圖  技術支持:化工儀器網  管理登陸

国产精品免费无遮挡无码永久视频| 国产精品毛片AV一区二区三区| 乱LUN合集1第40部分阅读| 少妇少洁第1一40章| 久久精品中文字幕一区二区三区| 99RE6在线视频精品免费| 色哟哟网站入口在线观看视频| 末发育娇小性色XXXX| 男人扒开添女人下部免费视频| 极品粉嫩国产18尤物在线播放| 国产精品99无码一区二区| 久久久亚洲精品无码| 久久热这里只有精品| 成年性生交大片免费看| 日本精品无码一区二区三区久久久 | 国产真实伦熟女实例HD| 99香蕉国产精品偷在线观看| 无限看片的视频高清在线| 老师在办公室被躁在线观看| 女人与公拘交酡全过程| 国产精品久久无码一区| 国产大人和孩做爰BD| 日韩精品无码人妻一区二区三区 | 精品一区二区三区在线观看| 肉乳床欢无码A片120秒厨房里 | 无码国产精品一区二区免费式影视 | 久久亚洲精品无码| 国产精品人妻一区夜夜爱| 国产精品久久人妻拍拍水牛影视| 最近2019中文字幕大全第二页| 亚洲欧美日韩久久精品第一区| 丰满少妇高潮惨叫正在播| 丰满大爆乳波霸奶| 久久99精品久久久久久水蜜桃| 免费中国帅气体育生gary| 又黄又爽又猛1000部A片| 欧美精品九九99久久在免费线| 在车里掀起乳罩啃咬奶头| 才几天没做你就叫成这样| 老扒夜夜春宵伴娇熄法蓉 | 亚洲国产精品久久久久秋霞小 |